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      Y187 Chemically Competent Cell

      Y187 Chemically Competent Cell

      簡要描述:

      Y187 Chemically Competent Cell 酵母感受態(tài)細(xì)胞 克隆與表達(dá)分析:Y187是GAL4系統(tǒng)酵母單雜交/雙雜交用實(shí)驗(yàn)菌株,MATα型,能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?;蚺cMATa型酵母菌株(如Y2HGold,AH109等)通過接合(mating)操作進(jìn)行蛋白相互作用驗(yàn)證或雙雜交文庫篩選和構(gòu)建。

      產(chǎn)品時間:2024-03-21

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      Y187 Chemically Competent Cell

      酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

       

      產(chǎn)品標(biāo)簽

      Matchmarker GAL4雙雜交系統(tǒng);Y2HGold;pGBKT7;Y187;pGADT7;AUR1-C;Aureobasidin A AbA);金擔(dān)子素;

      產(chǎn)品信息

      產(chǎn)品名稱

      產(chǎn)品編號

      規(guī)格

      價格(元)

      Y187 Chemically Competent Cell 

      酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

      MF2354-1000UL

      10×100μl

      290

      MF2354-5000UL

      50×100μl

      1320

      產(chǎn)品包裝

      組分編號

      組分名稱

      保存

      貨號(規(guī)格)

      MF2354-1000UL

      MF2354-5000UL

      MF2354-A

      Y187 Competent Cell

      -80

      10×100μl

      50×100μl

      MF2354-B

      pGADT7 Control Vector (10ng/μl)

      -80

      10μl  

      10μl  

      MF2354-C

      Carrier DNA (5μg/μl)

      -20

      100μl 

      500μl 

      MF2354-D

      PEG/LiAC Solution

      +4

      5ml

      25ml

      產(chǎn)品描述

      Y187GAL4系統(tǒng)酵母單雜交/雙雜交用實(shí)驗(yàn)菌株,MATα型,能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?;蚺cMATa型酵母菌株(如Y2HGold,AH109等)通過接合(mating)操作進(jìn)行蛋白相互作用驗(yàn)證或雙雜交文庫篩選和構(gòu)建。Y187-GAL4酵母雙雜交系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用,分別為pGBKT7pGADT7。前者篩選標(biāo)志為Trp1,用于表達(dá)DNA-BD與誘餌蛋白(bait)的融合蛋白;后者篩選標(biāo)志為Leu,用于表達(dá)AD與誘捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y187有兩個報告基因:lacZ,MEL1,分別由兩種*異源的Gal4反應(yīng)啟動元件-G1,M1操控,這兩種啟動子只有GAL4識別的17bp核心區(qū)相同,其余部分都不同,因此大大降低了酵母雙雜交假陽性發(fā)生的概率。

      本品為經(jīng)特殊工藝制備的Y187酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞,用pGADT7質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>104cfu/μg DNA。且在-80能穩(wěn)定保存三個月。

      基因型

      MATα, ura3-52, his3-200, ade 2-101, trp 1-901, leu 2-3, 112, gal4Δ, met-, gal80Δ, URA3:: GAL1UAS-Gal1TATA-- lacZ, MEL1

      注意事項(xiàng)

      1.在冰上融化感受態(tài)細(xì)胞。

      2.轉(zhuǎn)化高濃度質(zhì)??上鄳?yīng)減少用于涂板的菌量。同時轉(zhuǎn)化2-3種質(zhì)??蛇m當(dāng)增加質(zhì)粒的用量。

      3.Y187對高溫敏感,zui適生長溫度為27-30,一旦高于31,生長速度和轉(zhuǎn)化率都呈指數(shù)下降。

      4.菌落變粉紅色并不是污染,而是酵母細(xì)胞生長中的一種常見現(xiàn)象。當(dāng)酵母細(xì)胞在平板上培養(yǎng)幾天,將平板內(nèi)的腺嘌呤消耗殆盡,那時酵母試圖通過自身代謝途徑合成腺嘌呤以供利用。然而,某些菌株ADE2基因被破壞,腺嘌呤合成受阻。且ADE4,5,67基因均正常。由此,造成中間產(chǎn)物P-ribosylamino imidazoleAIR)在細(xì)胞的積累使得菌落變?yōu)榉奂t色。

      5.酵母菌在缺陷培養(yǎng)基上生長速度比YPDA培養(yǎng)基慢,營養(yǎng)缺陷成分越多,生長越慢,以轉(zhuǎn)化涂板為例:涂YPDA平板于29,48h培養(yǎng)可見直徑1mm克??;涂SD單缺平板于29,48-60h培養(yǎng)可見直徑1mm克?。煌?/span>SD雙缺平板于2960-80h培養(yǎng)可見直徑1mm克??;涂SD三缺或四缺平板于29,80-90h培養(yǎng)可見直徑1mm克隆;

      6.為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

       

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      250g

       

       — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

       

      上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠為信、合同守信的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

       

      Y187 Chemically Competent Cell 酵母感受態(tài)細(xì)胞 克隆與表達(dá)分析

      Y187 Chemically Competent Cell 酵母感受態(tài)細(xì)胞 克隆與表達(dá)分析

       

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